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更新時間:2026-01-06
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Alzet微泵標(biāo)準(zhǔn)操作步驟第一步:實驗設(shè)計
1. 選擇泵型號:根據(jù)您的實驗周期(如7天、14天、28天)和所需輸注速率(如0.5 μL/h)選擇合適的微泵型號。
2. 計算藥物濃度:
公式:所需給藥劑量 ÷ 輸注速率 = 藥物儲備液濃度
示例:希望以 1 mg/kg/day 的劑量給一只25g小鼠給藥,泵的速率是0.5 μL/h。
每日劑量 = 1 mg/kg 0.025 kg = 0.025 mg。
每日泵出體積 = 0.5 μL/h 24 h = 12 μL。
藥物濃度 = 0.025 mg / 12 μL ≈ 2.08 mg/mL。
確保藥物在該溶劑中穩(wěn)定且能溶解。
Alzet微泵標(biāo)準(zhǔn)操作步驟第二步:泵的準(zhǔn)備
1. 填充藥液:
使用提供的填充管和注射器,嚴(yán)格按說明書操作,將藥物溶液緩慢注入泵體,確保排空所有氣泡。
關(guān)鍵:填充后,建議將泵放入充滿無菌生理鹽水的容器中,在37°C孵化箱內(nèi)孵育特定時間(如4-6小時或過夜)。這一步稱為 “ priming ”,目的是激活滲透泵,使其在植入前就已達(dá)到穩(wěn)定流速。
2. 檢查流速:孵化后,檢查泵的出口是否有液滴形成,確認(rèn)其已開始工作。
Alzet微泵標(biāo)準(zhǔn)操作步驟第三步:手術(shù)植入
1. 麻醉與備皮:用異氟烷等麻醉劑深度麻醉小鼠,剃除其肩胛骨間區(qū)域的毛發(fā)并進(jìn)行消毒。
2. 制作皮下囊袋:在小鼠背部中線皮膚做一個約1cm的小切口。用鈍頭剪刀或止血鉗向切口前端(頭部方向)小心分離出一個足以容納微泵的皮下囊袋。
3. 植入微泵:將priming好的微泵的流出口朝向小鼠頭部,輕輕塞入囊袋中。確保泵在囊袋內(nèi)可以自由移動,沒有過度的張力。
4. 縫合切口:用手術(shù)縫合線或皮膚粘合劑關(guān)閉切口。
Alzet微泵關(guān)鍵注意事項:
1. 溶劑兼容性:必須確保您使用的溶劑與泵的材質(zhì)兼容。DMSO 等強(qiáng)有機(jī)溶劑可能會損壞泵體,使用時需選擇特定型號或降低濃度。
2. 藥物穩(wěn)定性:藥物在37℃的泵內(nèi)和溶劑中必須能穩(wěn)定存在整個實驗周期,否則會降解失效。
3. 無菌操作:整個填充和植入過程需在無菌條件下進(jìn)行,以防感染。
4. 泵的方向:植入時流出口務(wù)必朝向頭部,否則可能導(dǎo)致輸注不暢或組織損傷。
5. 動物觀察:術(shù)后密切觀察小鼠的體重、活動性和傷口愈合情況,直至其恢復(fù)。
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