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更新時間:2026-01-09
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一、 什么是重組蛋白?
重組蛋白,是指利用重組DNA技術,將目標蛋白的編碼基因導入宿主細胞(如細菌、酵母、昆蟲或哺乳動物細胞)中,通過宿主細胞的表達系統進行轉錄和翻譯,從而大量生產出的蛋白質。
核心原理:打破物種界限,實現特定蛋白的“異地"規模化生產。
二、 重組蛋白生產的四大核心步驟(原理流程)
其基本原理可概括為“尋、造、產、純"四個關鍵環節
第*步:基因獲取與載體構建
首先,需要獲得編碼目標蛋白的基因序列。這可以通過從生物組織中提取mRNA并反轉錄,或直接根據已知序列人工合成。接著,將該基因片段插入一個特殊的環狀DNA分子——表達載體中。這個載體就像一輛“運輸卡車",不僅裝載著目標基因,還配備了強大的“發動機"(啟動子,如CMV、T7等)和“導航系統"(篩選標記,如抗性基因),確保基因能被高效讀取并篩選出成功接收載體的細胞。
第二步:轉化與轉染(造)
將構建好的重組表達載體導入選定的宿主細胞中。對于細菌(如大腸桿菌),這個過程稱為轉化;對于動物細胞,則稱為轉染。成功接收了外源基因的細胞,就變成了一個能生產目標蛋白的“微型工廠"。
第三步:細胞培養與蛋白表達(產)
將工程化的細胞在適宜條件下(如發酵罐或生物反應器中)進行大規模培養。通過調節溫度、營養物質或添加誘導劑(如IPTG)來“啟動"表達系統,驅使細胞利用自身的核糖體等機器,大量合成目標蛋白質。
第四步:蛋白純化與鑒定(純)
表達結束后,破碎細胞,釋放出蛋白質。隨后利用目標蛋白的獨特性質(如電荷、大小、疏水性或特異性標簽),通過一系列層析技術(如親和層析、離子交換層析)將其從成千上萬種細胞雜質中精細地純化出來。最后,必須對純化后的蛋白進行嚴格的鑒定,包括:
SDS-PAGE電泳:驗證純度和分子量。
Western Blot:確認蛋白身份。
質譜分析:精確測定分子量和氨基酸序列。
活性/功能測定:確保蛋白具有預期的生物學功能。
三、重組蛋白廠家
目前,國內外眾多生物科技公司均提供重組蛋白產品。國際品牌包括R&D Systems、PeproTech和Abcam,以其高質量和廣泛驗證數據著稱,是許多研究的shou選。國產品牌也已崛起,義翹神州、近岸蛋白和百普賽斯等提供了覆蓋全面、性價比高且供應鏈穩定的豐富產品線,尤其在人源蛋白和病毒抗原領域具有優勢。此外,ACROBiosystems在藥物研發用蛋白(如熱門靶點蛋白和生物素標記蛋白)方面特色突出。選擇時,您可以根據具體的蛋白靶點、所需的修飾類型(如標簽、生物素化)、應用場景(如免疫檢測、細胞功能研究)以及預算,在這些主流供應商的進行精確檢索和對比。
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