Zymo 質(zhì)粒中提/大提試劑盒采用硅膠模吸附技術(shù),專(zhuān)一地結(jié)合質(zhì)粒DNA。同時(shí)采用特殊的溶液P4和過(guò)濾器CS1,可有效的出去內(nèi)毒素、蛋白質(zhì)雜志;整個(gè)提取過(guò)程僅需1h,方便快捷。使用本試劑盒提取的質(zhì)粒DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測(cè)序、連接、轉(zhuǎn)化和細(xì)胞轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞等試驗(yàn)。推薦每次菌液使用量:高拷貝質(zhì)粒推薦使用量為100ml,得率一般在500-1500ug左右;低拷貝質(zhì)粒推薦使用量為200ml,得率一般在200-600ug左右。
Zymo 質(zhì)粒中提/大提試劑盒注意事項(xiàng):請(qǐng)務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng)。
1.溶液P1在使用前先加入RNaseA(將試劑盒中提供的RNaseA全部加入),混勻,置于2-8℃保存。
2.使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說(shuō)明先在漂洗液PW中加入無(wú)水乙醇。
3.使用前先檢查平衡液BL,溶液P2和P4是否出現(xiàn)結(jié)晶或者沉淀,如有結(jié)晶或者沉淀現(xiàn)象,可在37℃水浴中加熱幾分鐘,即可恢復(fù)澄清。
4.注意不要直接接觸溶液P2和P4,使用后應(yīng)立即蓋緊蓋子。
5.使用過(guò)濾器時(shí)請(qǐng)將推柄小心緩慢地從過(guò)濾管中抽出,避免濾膜因壓力而松動(dòng)。
6.提取的質(zhì)粒量與細(xì)菌培養(yǎng)濃度,質(zhì)粒拷貝數(shù)等因素有關(guān)。如果所提質(zhì)粒為低拷貝質(zhì)粒或大于10kb的大質(zhì)粒,應(yīng)加大菌體使用量,同時(shí)按比例增加P1、P2、P4的用量;洗脫緩沖液推薦在65-70℃水浴中預(yù)熱,可以適當(dāng)延長(zhǎng)吸附和洗脫時(shí)間,以提高提取效率。
7.實(shí)驗(yàn)前使用平衡液BL處理吸附柱,可以激活硅基質(zhì)膜,提高得率。
8.用平衡液處理過(guò)的柱子建議立即使用,放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)影響使用效果。