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更新時間:2026-01-06
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Western Blot條帶彌散?本文解析密理博PVDF膜孔徑選擇、甲醇活化、抗體回收三大核心技巧,提供轉印效率≥95%方案!附膜厚度/孔徑/適用分子量對照表,解決高背景、低靈敏度痛點。
一、為什么頂級實驗室只用密理博PVDF膜?
傳統NC膜痛點:
?? 低分子量(<20kDa)蛋白穿透
?? 機械強度差(轉印破裂)
?? 抗體回收率<30%
密理博PVDF膜憑借三明治微孔結構實現:
? 0.1ng級超敏檢測(ECL發光)
? 重復剝離3次(抗體回收率>85%)
? 耐受SDS煮沸(零變形)


二、密理博PVDF膜3大黃金選型規則(附避坑清單)
規則1:孔徑決定分辨率
| 分子量范圍 | 推薦孔徑 | 典型案例 |
| >50kDa | 0.45μm | 胞漿蛋白(β-actin) |
| 10-50kDa | 0.2μm | 細胞因子(IL-6) |
| <10kDa | 0.1μm Immobilon® | 多肽(胰島素) |
?? 致命錯誤:0.45μm膜轉小分子 → 條帶消失!
規則2:甲醇活化科學流程
避坑:
? 省略甲醇 → 蛋白吸附率暴跌70%
? 浸泡>60秒 → 膜脆化破裂
規則3:優化轉印參數
| 條件 | 標準值 | 異常后果 |
| 電壓 | 100V × 60min | 高壓→ 條帶扭曲 |
| 緩沖液溫度 | 4℃(冰浴轉印) | 升溫→ 條帶彌散 |
| 膜/膠尺寸匹配 | 精確對齊 | 邊緣效應→ 信號不均 |
三、密理博PVDF膜碾壓競品的4大核心技術
超低背景熒光膜(Immobilon®-FL)
適用近紅外二區成像(800nm通道)
信噪比提升5倍 vs 普通PVDF
預裁切膜規格(8.6×6.4cm)
匹配迷你膠(免裁剪防污染)
對稱結構
正反面無差異 → 轉印無需標記方向
內毒素控制
<0.01EU/cm² → 杜絕磷酸化位點干擾
四、密理博PVDF膜用戶實證數據
| 指標 | 密理博PVDF | 競品A膜 |
| 檢測限 | 0.1ng | 0.5ng |
| 轉印效率 | 98% | 85% |
| 重復剝離次數 | 3次 | 1次 |
| 背景值(ECL) | <0.05 | 0.2 |
五、購買渠道
密理博millipore代理——天津益元利康生物科技有限公司,提供PVDF膜,超濾離心管等,歡迎咨詢選購。